二氧化碳培养箱是细胞、组织、细菌培养的一种*仪器,是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备,CO2培养箱是在普通培养的基础上加以改进,主要是能加入CO2,以满足培养微生物所需的环境。
在细胞培养房,二氧化碳培养箱为细胞生长提供了理想的生长环境,细胞在培养箱中培养数月甚至数年,如果培养不当导致细胞死亡可能造成极大的科研成果损失。培养箱本身性能的稳定和可靠性固然重要,另外,正确的使用方法和日常保养、清洁、消毒对实验结果也是至关重要。
混入二氧化碳培养箱(细胞培养环境)中,对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染。不同的污染物对细胞的影响也有差别,有的影响是长期、缓慢和潜在的,而有的则能在很短的时间内抑制细胞生长或产生有毒物质细胞。根据污染源不同主要可以分为:生物性污染、化学性污染、物理性污染和气溶胶污染。
1、生物性污染:这是常见也是危害较大的污染。如细菌、病毒、真菌,支原体等。这些污染源有可能是人为带入,或是细胞在放入二氧化碳培养箱前已经受污染,再或者是箱体本身没有消毒干净。体外培养的细胞自身没有抵抗污染的能力,而培养基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而细胞微生物污染一旦发生往往是无法挽救的。
2、化学性污染:二氧化碳培养箱中许多化学物质都可以引起细胞污染。如细胞培养容器清洗过程中残留的洗涤剂、加湿器中未纯化的水、人为带入的液体或气体都可能成为化学性污染的来源。不同化学物质对细胞污染是不一样的,有的可能促进或抑制细胞生长,有的甚至杀死细胞。
3、物理性污染:培养环境中的物理因素,如温度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光)会对细胞产生影响。物理性污染常常被人们所忽视或被笼统地归为化学性污染,其主要是在代谢水平或分子水平上,影响细胞正常的生理过程。
4、气溶胶污染:气溶胶是液体或固体微粒均匀地悬浮在气体介质中的分散体系,当微粒是微生物时,就是微生物气溶胶,如果这种微生物是病原性的,就是病原微生物气溶胶。细菌、病毒等病原体通过气溶胶可在人与人、人与环境之间传播。
消毒是指杀死微生物的物理或化学手段,但不一定杀死其孢子。灭菌是指杀死所有微生物,当二氧化碳培养箱内细胞受到污染时则需要采取灭菌措施。一般,在二氧化碳培养箱内细胞没有污染的情况下平均1-3个月*消毒一次。常用的3种消毒灭菌的方式是:液体消毒剂、紫外和加热。
①液体消毒剂:选择对二氧化碳培养箱无腐蚀性的液体消毒剂,并且液体消毒剂的消毒效果好坏和很多因素有关。
②紫外消毒:一般先用蒸馏水清洗干净后,再用培养箱自带的紫外灯照射一天或者用手提式的紫外灯照射。因被遮挡时或距离远时都会削弱紫外灭菌的效果,因此紫外灭菌方式较为简单,但效果不够理想。
③加热:湿热和干热被认为是杀菌有效的方法。在一般环境下,高压灭菌器加热到121℃快速产生蒸汽是方便的方法,但是二氧化碳培养箱无法进行高温高压灭菌,只能退而求其次进行90℃湿热灭菌,但90℃因为温度过低,起不到100℃以上水蒸气所带来的渗透性和高压力效果,所以灭菌效果也大打折扣。
细胞培养箱消毒工作很是辛苦,但也非常必要和有效。那么是否有更加轻松而有效的二氧化碳培养箱灭菌方法呢。自从诺威仕登上市场的舞台,答案是肯定的,小型KVBOX干雾灭菌仪正是二氧化碳培养箱的全自动高效灭菌器,专为培养箱而设计,其轻巧、便捷、快速,自带电池,远程遥控,动态可视化的精准消毒方案。
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